检验职称考试初中级知识点梳理口袋书第
检验职称考试复习时一个漫长的过程，从报名开始到考试结束要经历看书-做题-再看书-考前冲刺整个过程，如何精准复习（医学谷往年分析），利用碎片时间学习是考试成功的关键一步，小谷精心准备的口袋书或许能帮助到您。
第十二部分
微生物学和微生物检验之六
临床标本采集与运送
采血量：静脉成人10~20ml、儿童3~5ml、婴儿1~2ml
床边采血注入血液培养基否则用SPS抗凝剂抗凝后送检，不得用EDTA、枸橼酸钠
血液标本培养阳性结果，三级报告方式
痰标本：军团菌、支原体、病毒等用免疫荧光抗体染色
痰涂片格兰染色判断痰标本质量：合格标本室含白细胞、脓细胞和支气管柱状上皮较多；受污染标本室扁平上皮细胞较多。以白细胞＞25、鳞状上皮＜10个为合格标本
加入胰酶溶液使痰均质化
尿液标本培养基：普通细菌选用血平板、中国蓝琼脂平板或麦康凯琼脂平板
阴性~48小时无菌生长
阳性~格兰阴性杆菌＞10*5；革兰阳性球菌＞10*4有诊断意义
尿路感染的细菌数＜10*4多为污染；尿路感染细菌数达10*4~10*5为可疑阳性
临床标本微生物iany的意义
血液~G—杆菌侵犯机体免疫功能低下的病人；葡萄球菌菌血症常由脓肿及烧伤创面等原发感染灶继发。厌氧菌的菌血症常合并需氧感染、免疫低下者常出现真菌菌血症
脑脊液~细菌性脑膜炎是中枢神经系统感染的常见类型。真菌性脑膜炎常见于隐球菌脑膜炎；流行性乙型脑炎可获得持久免疫力、再发者极少见
痰液~条件致医院内肺炎的主要致病菌；真菌性肺炎多为条件致病性真菌感染，常以白假丝酵母为主
粪便~消化性溃疡由幽门螺旋杆菌感染引起
创伤~感染以化脓性炎症改变为主；外伤性创伤以葡萄球菌和链球菌多见；
深部创伤易引发破伤风和气性坏疽；烧伤创面以G—杆菌最常见；
慢性化脓性骨性关节炎、慢性骨髓炎常由结核分枝杆菌引起
放线菌多引起内源性感染
细菌对药物的敏感试验
抗菌药物选择参考NCCLS的有关文件
分为4组：A组为常规首选药敏试验药物；B医院内感染的药物；C组替代性或补充性抗微生物药物；U组治疗泌尿道感染的抗微生物药物
需氧和兼性厌氧的体外抗菌药敏试验
K-B法（扩散法）
形成无菌生长的透明抑菌圈，其大小与该药对待检菌最低抑菌浓度(MIC)呈负相关
材料：水解络蛋白（M-H）琼脂、PH7.2、琼脂厚度4mm(如链球菌加入5%脱纤维羊血、嗜血杆菌加入1%5、10因子)
矫正菌液至0.5麦氏比浊标准（1.5*10*9的含菌量）
培养基：某些蛋白质和氨基酸对磺胺类药物有拮抗作用
偏碱性可扩大氨基糖苷类药物的抑菌圈
偏酸性可扩大四环素族药物的抑菌圈
琼脂的含量也影响抑菌圈的大小
药物纸片：纸片的含药量是影响抑菌圈大小的主要因素
菌量增加~抑菌圈缩小
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稀释法（肉汤稀释法）
琼脂稀释法是细菌药敏试验的金标准；可测抗菌药物最低抑菌浓度（MIC），也可测最小杀菌浓度（MBC）
抗菌药物要采用标准粉剂
结果观察在12~18小时之间观察
杀菌试验
杀灭99.9%以上测试菌量的最低药物浓度
体外联合药物明试验
联合抑菌试验
试管棋盘（方阵）稀释法：
首先测定联合药物对测试菌的MIC；药物最高浓度为其MIC的2倍，依次对倍系列稀释
FIC指数=A药联合MIC/A药单时MIC+B药联合时MIC/B药单时MIC
FIC指数＜0.5为协同作用
在0.5~1为相加作用
1~2为无关作用
＞2为拮抗作用
厌氧菌体外药敏试验的培养基是布氏培养基。
真菌体外药敏试验
肉汤稀释法：药物稀释用培养基进行系列稀释，浓度为待测浓度的10倍
结果判定：两性霉素B的MIC为抑制测试菌肉眼可见生长的最低药物浓度；
5-佛胞嘧啶和吡格类采用80%MIC判断标准
体内抗菌药物的活性与浓度测定
血清抑菌/杀菌力高于1:8或1:16时治疗方案有效，高于1:64时为严重感染
细菌的耐药性和产生机制
产生钝化酶
产β-内酰胺酶是细菌对β—内酰胺类药物耐药的主要机制
细菌耐药性表型检测方法
超光谱β—内酰胺酶（ESBLs）
K-B法~抑菌环相差》5mm可判断为产ESBLs菌株
稀释法~降低3个以上稀释倍数~可判断为产ESBLs菌株
葡萄球菌属
耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）：筛选需要含4%NACI的MH琼脂
肠球菌属
纸片扩散法：直径《6mm为耐药；》10mm为敏感
肺炎链球菌
肺炎链球菌对青霉素的耐药是由于PBPs改变减低了对β—内酰胺类的亲和力
产AmpC酶的革兰阴性杆菌
属于Bush1型酶、又称染色体1型酶
临床一旦发现AmpC菌株感染，应控制除4代头孢菌素意外的β—内酰胺类
医院感染
通常有关症状出现在患者入院48小时后
引起医源性感染的病原微生物多为细菌、且绝大多数为条件致病菌或腐生菌
医院感染中G—杆菌占重要地位，
特别注意MRSA及耐万古医院感染
生物指标：
高压灭菌指示菌为~嗜热脂肪芽孢杆菌（ATCC）
紫外线消毒指示菌为~枯草芽孢杆菌黑色变种（ATCC）
二氧化碳培养箱：CO2含量为5~10%
厌氧箱：绝对无氧，常用亚甲蓝检测（无氧无色、有氧状态为蓝色）
高压灭菌后留点温度计读数超过℃达到灭菌温度
接种环：长5~8cm，环直径约3mm
英国菌种保藏中心（NCTC）
美国（ATCC）
中国（CMCC）
实验室安全防护一级最低、4级最高
说明：资料整理自网络，可能知识点存在遗漏或不正确，请以教材为准
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